百迪Advance人多能干細胞培養(yǎng)基（替代E8和mTeSR）400ml+100ml
- 品名： 百迪Advance人多能干細胞培養(yǎng)基（替代E8和mTeSR）400ml+100ml
- 型號： S1001-500
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | 人多能干細胞培養(yǎng)基制備： 1. 將 Advance 人多能干細胞基礎培養(yǎng)基提前恢復至室溫，添加劑解凍后翻轉(zhuǎn)混勻。 2. 然后將 100ml 添加劑無菌轉(zhuǎn)移到 400ml Advance 人多能干細胞基礎培養(yǎng)基，混勻得到完全培養(yǎng)基。 3. 配制好的完全培養(yǎng)基可在 2°C-8°C 下儲存 2 周。 人多能干細胞復蘇： 1. 提前用基質(zhì)膠包被 6 孔板，每孔內(nèi)加入 1ml 基質(zhì)膠輕輕晃動使其完全覆蓋皿底，置于 37℃ 培養(yǎng)箱中孵育1h~2h，實驗前拿出并置于生物安全柜中室溫下平衡 20 min。 2. 將 Advance 多能干細胞完全培養(yǎng)基提前預熱，取 5~10ml 加入 15ml 離心管中備用。 3. 將凍存的多能干細胞從液氮中取出，37°C 水浴中快速融化，當只剩下一塊小冰晶時，將凍存管從水浴中取出，噴灑 70%的乙醇，然后放在生物安全柜中。 4. 將解凍的細胞轉(zhuǎn)移到提前備好的含完全培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，1000rpm 離心 3min。 5. 丟棄上清液，并將細胞沉淀重懸于 2ml 完全培養(yǎng)基混勻，將細胞懸液緩慢添加到基質(zhì)膠包被的 6 孔板中，6 孔板的每個孔接種密度約 100 萬個活細胞。 6. 輕輕晃動 6 孔板使細胞均勻分布，置于 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 7. 第 2 天觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，此后每天更換培養(yǎng)基，直到細胞長至約 85% 匯合度。 人多能干細胞傳代： 1. 將 Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基及消化液提前預熱。 2. 棄掉原有培養(yǎng)基，貼壁緩慢加入 DPBS 清洗，然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去 DPBS 緩沖液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干細胞消化液使之覆蓋皿底，并置于室溫孵育 5-8min 或在 37°C下孵育 4-5min（消化時間依據(jù)干細胞生長密度，消化時間略有不同，消化過程中可在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若在顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣以及克隆內(nèi)部細胞間出現(xiàn)間隙，即可吸掉消化液終止消化）。 4. 將消化液吸掉后，加入 2ml Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基，用移液槍輕柔吹打 3~5 次，使皿底干細胞集落脫落，并將其并轉(zhuǎn)移到 15mL 離心管中，少量殘余的細胞集落沒有脫落屬于正?，F(xiàn)象。 5. 添加適當體積的預熱完全培養(yǎng)基到基質(zhì)膠包被的 6 孔板中，將細胞懸浮液混勻后按一定比例接種至孔板中，輕輕晃動 6 孔板使細胞均勻分布，置于 37°C、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜。 6. 第 2 天觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，此后每天更換培養(yǎng)基，直到細胞長至約 85% 匯合度。 人多能干細胞凍存： 1. 將 Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基及消化液提前預熱。 2. 棄掉原有培養(yǎng)基，貼壁緩慢加入 DPBS 清洗，然后沿培養(yǎng)皿邊緣吸去 DPBS 緩沖液。 3. 每孔加入 1-2ml 人多能干細胞消化液使之覆蓋皿底，并置于室溫孵育 5-8min，或在 37°C 下孵育 4-5min。 4. 將消化液吸掉后，加入 2ml Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基，用移液槍輕柔吹打 3~5 次，使皿底干細胞集落脫落，并將其并轉(zhuǎn)移到 15ml 離心管中，1000rpm 離心 3min。 5. 棄上清，加入無血清干細胞凍存液重懸，輕輕吹打混勻，轉(zhuǎn)入到凍存管中。 6. -80℃冰箱凍存過夜后轉(zhuǎn)入液氮中長期保存。 |
| 注意事項 | 1. Advance 人多能干細胞培養(yǎng)基添加劑在室溫或 2-8℃解凍，避免反復凍融。 2. 配制好的 Advance 人多能干細胞完全培養(yǎng)基可在 2°C-8°C 下儲存 2 周。 3. 傳代后可見細胞碎片和小菌落是正?，F(xiàn)象。 4. 使用本產(chǎn)品時應嚴格按照無菌操作的規(guī)程進行操作。 |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 |
產(chǎn)品詳情
誘導多能干細胞 (iPSCs) 和胚胎干細胞 (ESC)，有時統(tǒng)稱為多能干細胞 (PSC)，是一種在適當微環(huán)境中具有無限自我更新能力和分化成幾乎任何細胞類型的細胞。這些獨特的性能使誘導多能干細胞和胚胎干細胞能夠應用于疾病建模、藥物發(fā)現(xiàn)、藥物毒性測試和細胞治療。BDBIO 人多能干細胞培養(yǎng)基是一款營養(yǎng)成分更豐富，內(nèi)含干細胞保護因子，可應用于干細胞傳代，防止細胞的凋亡、分化，對細胞具有良好的保護作用。本產(chǎn)品無動物源組分、成分完全明確、無滋養(yǎng)層，可替代 Essential 8 培養(yǎng)基和 mTeSR 培養(yǎng)系統(tǒng)，適用于大多數(shù)多能細胞系培養(yǎng)，包括 iPS 建系，胚胎和誘導性人多能干細胞 (PSC) 的生長和擴增。
暫無內(nèi)容...
